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層析柱
層析柱
層析柱

層析柱是凝膠層析技術中的主體,一般用玻璃管或有機玻璃管。根據樣品混合物中各組分在固定相和流動相中分配係數不同,從而分離的一種層析法。

層析柱的直徑大小不影響分離度,樣品用量大,可加大柱的直徑,一般製備用凝膠柱,直徑大於2厘米,但在加樣時應將樣品均勻分布於凝膠柱床麵上。此外, 直徑加大,洗脫液體體積增大,樣品稀釋度大。分離度取決於柱高,為分離不同組分,凝膠柱床必須有適宜的高度,分離度與柱高的平方根相關,但由於軟凝膠柱過高擠壓變形阻塞,一般不超過1米。分族分離時用短柱,一般凝膠柱長20-30厘米,柱高與直徑的比較5:1─10:1,凝膠床體積為樣品溶液體積的4-10倍。 分級分離時柱高與直徑之線為20:1─100:1,常用凝膠柱有50×25厘米,10×25厘米。層析柱濾板下的死體積應盡可能的小,如果支掌濾板下的死體積大,被分離組分之間重新混合的可能性就大,其結果是影響洗脫峰形,出現拖尾出象,降低分辯力。在精確分離時,死體積不能超過總床體積的1/1000。


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